WWW.BOOK.LIB-I.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Электронные ресурсы
 
s

«Н. А. Бабенко, Г. В. Стороженко НИИ биологии Харьковского национального университета им. В. Н. Каразина, 1022 Харьков КОРРЕКЦИЯ ВОЗРАСТНОГО ...»

"Проблемы старения и долголетия", 2015, 24, № 3—4. – С. 257—265

УДК 615.2:577.125.8+612.66

Н. А. Бабенко, Г. В. Стороженко

НИИ биологии Харьковского национального университета

им. В. Н. Каразина, 1022 Харьков

КОРРЕКЦИЯ ВОЗРАСТНОГО НАРУШЕНИЯ

СОДЕРЖАНИЯ КАРДИОЛИПИНА В ТКАНЯХ

КРЫС ПУТЕМ ПОДАВЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ

НЕЙТРАЛЬНОЙ СФИНГОМИЕЛИНАЗЫ

Нарушение метаболизма сфинголипидов, приводящее к накоплению церамидов в старости и при патологических состояниях, как правило, сопровождается нарушением функционирования митохондрий и снижением уровня кардиолипина, что позволяет предположить возможность модулирования содержания кардиолипина путем коррекции метаболизма сфинголипидов. Учитывая, что N-ацетилцистеин эффективно снижает уровень церамида, подавляя активность нейтральной сфингомиелиназы, целью настоящей работы явилось изучение возможности коррекции содержания церамида и кардиолипина в тканях старых крыс. Установлено, что введение N-ацетилцистеина 24-месячным крысам снижало уровень церамида и соотношение церамид/сфингомиелин, а также восстанавливало содержание кардиолипина в сердце и печени старых крыс до уровня молодых животных.

Полученные данные позволяют предположить, что возрастное нарушение метаболизма кардиолипина во многом опосредуется накоплением церамида в клетках.

Ключевые слова: старение, кардиолипин, церамид, N-ацетилцистеин, нейтральная сфингомиелиназа.

Кардиолипин играет важную роль в таких ключевых биологических процессах, как деление, апоптоз, старение и ответ клетки на стресс [11, 17, 18, 21, 27]. Кардиолипин необходим для оптимального функционирования многих дыхательных и АТФ-синтезирующих ферментов, а снижение уровня этого фосфолипида приводит к снижению дыхательной активности митохондрий, увеличению проницаемости митохондриальН. А. Бабенко, Г. В. Стороженко, 2015 ISSN 0869 1703. ПРОБЛ. СТАРЕНИЯ И ДОЛГОЛЕТИЯ. 2015. Т.24. № 3–4 257 Н. А. БАБЕНКО, Г. В. СТОРОЖЕНКО ной мембраны, угнетению жизнеспособности клетки, апоптозу и как следствие – к развитию различных патологий [12—14, 20, 22]. Установлено, что важными модуляторами метаболизма кардиолипина в клетках являются церамиды [19, 24, 28], содержание которых существенно повышается в различных тканях в процессе старения [1, 6—8].

Церамид – сфинголипид мебранных структур клетки. Являясь вторичным мессенджером, церамид обладает антипролиферативными свойствами, модулирует фосфорилирование различных белков и является индуктором апоптоза [25]. Церамиды, подавляя дыхательную активность респираторной цепи и регулируя проницаемость внешней мембраны митохондрий для цитохрома с, изменяют функциональную активность митохондрий и метаболизм митохондриальных липидов [19, 24]. Учитывая эти данные, можно предположить, что накопление церамида в клетках может являться важной причиной снижения уровня митохондриального липида (кардиолипина) и подавления функции митохондрий в старости.

Известно, что одной из причин накопления церамида в клетках при старении является повышение активности сфингомиелиназ. В то же время, многочисленными исследованиями была продемонстрирована способность N-ацетилцистеина подавлять активность нейтральной сфингомиелиназы. Так, в клетках PC12 с индуцированной гипоксией [29], мозге, почках и мышечной ткани старых крыс [1, 8] N-ацетилцистеин, подавляя активность нейтральной сфингомиелиназы, снижал повышенный уровень церамида. Являясь предшественником глутатиона, N-ацетилцистеин повышает в клетках уровень последнего. Учитывая то, что глутатион является негативным модулятором нейтральной сфингомиелиназы в клетках, можно полагать, что влияние N-ацетилцистеина на содержание церамидов опосредовано глутатионом [26].





Целью настоящей работы явилось изучение влияния N-ацетилцистеина на содержание кардиолипина и церамида в различных тканях старых животных для коррекции возрастных нарушений уровня биологически активных липидов.

Материал и методы. Исследования проведены на 3- и 24-месячных крысах-самцах линии Вистар для изучения возрастных особенностей содержания липидов. Опытная группа 24-месячных крыс получала внутрижелудочно 3 ммоль/кг массы тела N-ацетилцистеин ("SigmaAldrich", Германия), растворенный в 1 % растворе глюкозы, в течение 18 сут. Объем вводимого препарата не превышал 1 мл. Контрольная группа 24-месячных животных получала растворитель N-ацетилцистеина – 1 % раствор глюкозы в тех же объемах. Экстракцию липидов из печени, сердца и коры мозга проводили методом E. G. Bligh и W. J. Dyer [10]. Разделение липидов на фракции проводили методом тонкослойной хроматографии на силикагеле (пластины "Sorbfil", Россия) в двух системах растворителей: 1-я система – диэтиловый эфир и 2-я система – хлороформ/метанол/вода (40:10:1, по объему) для сфинголипидов и хлороформ/метанол/уксусная кислота/вода (80:12:8:0,3, по объему) для ISSN 0869 1703. ПРОБЛ. СТАРЕНИЯ И ДОЛГОЛЕТИЯ. 2015. Т.24. № 3–4

КОРРЕКЦИЯ ВОЗРАСТНОГО НАРУШЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ КАРДИОЛИПИНА В ТКАНЯХ КРЫС... 259

фосфолипидов [2]. Количественное содержание кардиолипина определяли по неорганическому фосфору методом Бартлета [9] или методом окрашивания образцов флуоресцентным красителем N-нонил-акридин оранж, который с высокой аффинностью связывается с кардиолипином [15], а содержание белка в пробах – методом O. N. Lowry и соавт. [16].

Для сравнения данных содержания липидов в тканях контрольной и опытной групп крыс использовали однофакторный дисперсионный анализ one-way Anova и t-критерий Стьюдента.

Результаты и их обсуждение. В настоящей работе установлено существенное снижение содержания кардиолипина в печени и сердце 24-месячных животных по сравнению с 3-месячными (рис. 1). В печени и сердце 24-месячных крыс содержание кардиолипина составляет (55,5 ± 3,5) % и (27,9 ± 4,3) %, соответственно, от такового у 3-месячных крыс. В то же время, тенденция к снижению уровня кардиолипина в коре мозга старых крыс оказалась статистически незначимой (см.

рис. 1). Рядом исследователей показано, что при старении и развитии нейродегенаративных заболеваний, связанных с возрастом, решающее значение в изменении функционального состояния мозга имеет не только содержание кардиолипина, а изменение жирно-кислотного состава этого липида, увеличение его перекисных форм и накопление лизо-производных кардиолипина, что может приводить к нарушению сигнальных процессов в кортексе и гиппокампе [4, 5]. Снижение содержания кардиолипина в печени 24-месячных крыс (см. рис. 1) сопровождается увеличением содержания в этой ткани предшественника синтеза кардиолипина – фосфатидной кислоты (рис. 2). В то же время, уровень фосфатидной кислоты практически не изменяется в сердце и значительно снижается в мозге старых крыс по сравнению с 3-месячными животными. Введение 24-месячным животным N-ацетилцистеина восстанавливало сниженное содержание кардиолипина в сердце и печени до уровня молодых животных и повышало уровень кардиолипина в мозге по сравнению с 3- и 24-месячными контрольными крысами (см. рис. 1). В то же время, N-ацетилцистеин не оказывал влияния на содержание общих фосфолипидов в изученных тканях (рис. 3) и снижал уровень предшественника кардиолипина (фосфатидной кислоты) в печени старых крыс (см. рис. 2). Снижение уровня фосфатидной кислоты на фоне увеличения содержания кардиолипина может быть связано с активацией использования фосфатидной кислоты в синтезе фосфолипидов или снижением активности фосфолипазы D, тогда как отсутствие изменений фосфатидной кислоты в сердце и мозге при действии N-ацетилцистеина предполагает увеличение содержания кардиолипина за счет блокирования путей его деградации. Таким образом, установлено тканеспецифичное действие N-ацетилцистеина на содержание фосфатидной кислоты. Учитывая то, что фосфатидная кислота является не только предшественником синтеза кардиолипина в клетках, но и играет центральную роль в синтезе других липидов, можно полагать, что подавление активности нейтральной сфингомиелиназы N-аце

–  –  –

Рис. 2. Влияние N-ацетилцистеина на изменения уровня фосфатидной кислоты в различных тканях старых крыс.

Смещение баланса в обмене сфинголипидов в направлении выработки церамида может приводить к индукции апоптоза как путем кластеризации рецепторов, задействованных в передаче апоптотических сигналов на мембране, так и участием церамида в активации каспаз и образовании митохондриальных пор. Кроме синтеза церамида de novo в митохондриях и эндоплазматическом ретикулуме при участии церамидсинтазы значительная часть церамида является продуктом деградации мембранного сфингомиелина группой ферментов сфингомиелиназ.

ISSN 0869 1703. ПРОБЛ. СТАРЕНИЯ И ДОЛГОЛЕТИЯ. 2015. Т.24. № 3–4

КОРРЕКЦИЯ ВОЗРАСТНОГО НАРУШЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ КАРДИОЛИПИНА В ТКАНЯХ КРЫС... 261

Уровень церамида в клетках существенно возрастает в условиях естественного старения организма. Так, рядом исследований показано накопление церамида и повышение соотношения церамида к сфингомиелину в клетках стареющего организма [1, 6—8]. Изменение соотношения церамид/сфингомиелин является важным показателем активности сфингомиелиназ в клетках. Считается, что подавление активности нейтральной сфингомиелиназы и снижение соотношения церамид/сфингомиелин способствует повышению жизнеспособности клеток и снижению их чувствительности к различным проапоптотическим сигналам [3, 23].

Рис. 3. Отсутствие влияния N-ацетилцистеина на содержание общих фосфолипидов в различных тканях старых крыс. Светлые столбики – контрольные 24-месячные крысы, темные столбики – 24-месячные крысы, получавшие N-ацетилцистеин.

В то же время, введение N-ацетилцистеина животным на поздней стадии постнатального онтогенеза приводило к снижению уровня церамида и его отношения к сфингомиелину в сыворотке крови, скелетной мышечной ткани, почках [1], гиппокампе, неокортексе [8] и клетках печени [6]. В нашей работе введение N-ацетилцистеина старым крысам приводило к снижению содержания церамида и повышению уровня сфингомиелина в сердце животных опытной группы (рис. 4 А). Кроме того, в сердце старых крыс, получавших N-ацетилцистеин, наблюдается снижение соотношения церамид/сфингомиелин на 45,6 % по сравнению с животными контрольной группы (рис. 4 Б).

Показано, что накопление церамида в мембранах клеток в старости приводит к активации церамидзависимых сигнальных каскадов, ответственных, в частности за воспалительные процессы и активацию иммунной системы, что, в свою очередь, может провоцировать хронические воспалительные процессы в тканях. Вероятно, именно накопление метаболита сфингомиелина, церамида в печени и сердце, нарушая метаболизм кардиолипина, снижает его уровень, что способствует развитию митохондриальной дисфункции в старости.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что возрастные нарушения метаболизма важного митохондриального фосфолиISSN 0869 1703. ПРОБЛ. СТАРЕНИЯ И ДОЛГОЛЕТИЯ. 2015. Т.24. № 3–4 Н. А. БАБЕНКО, Г. В. СТОРОЖЕНКО пида – кардиолипина – являются обратимыми и могут ассоциироваться с нарушениями обмена сфинголипидов в клетках. Учитывая, что снижение уровня церамида и увеличение содержания сфингомиелина при действии N-ацетилцистеина приводит к восстановлению содержания кардиолипина в сердце и печени старых крыс до уровня молодых животных, можно сделать вывод о том, что возрастное снижение содержания кардиолипина может быть опосредовано активацией сфингомиелиназ и накоплением церамида в клетках стареющего организма.

–  –  –

Список использованной литературы

1. Бабенко Н. А., Тимофийчук О. А., Хассунех А. Х. М. Модуляция возрастных нарушений содержания сфинголипидов в тканях крыс при помощи ингибирования нейтральной сфингомиелиназы // Вісник Харківського нац. унту ім. В. Н. Каразіна. Серія: Біологія. – 2012. – 16, № 1035. – С. 152—158.

2. Кейтс М. Техника липидологии. – М.: Мир, 1975. – 322 с.

3. Adamy Ch., Mulder P., Khouzami L. et al. Neutral sphingomyelinase inhibition participates to the benefits of N-acetylcysteine treatment in post myocardial infarction failing heart rats // J. Mol. Cell Cardiol. – 2004. – 43, № 3. – P. 344—353.

4. Amoscato А. А., Sparvero L. J., He R. R. et al. Imaging mass spectrometry of diversified cardiolipin molecular species in the brain // Anal. Chem. – 2014. – 86, № 13. – Р. 6587—6595.

5. Arnal N., Castillo O., de Alaniz M. J. T., Marra C. A. Effects of copper and/or cholesterol overload on mitochondrial function in a rat model of incipient neurodegeneration. // Int. J. Alzheimers Dis. – 2013. [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.hindawi.com/journals/ijad/2013/645379/

6. Babenko N. A., Hassouneh L. K., Kharchenko V. S., Garkavenko V. V. Vitamin E prevents the age-dependent and palmitate-induced disturbances of sphingolipid turnover in liver cells // Age (Dordr). – 2011. – 34. – P. 905—915.

7. Babenko N. A., Shakhova E. G. Effects of Chamomilla recutita flavonoids on agerelated liver sphingolipid turnover in rats // Exp. Gerontol. – 2006. – 41, № 1. – Р. 32—39.

ISSN 0869 1703. ПРОБЛ. СТАРЕНИЯ И ДОЛГОЛЕТИЯ. 2015. Т.24. № 3–4

КОРРЕКЦИЯ ВОЗРАСТНОГО НАРУШЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ КАРДИОЛИПИНА В ТКАНЯХ КРЫС... 263

8. Babenko N. A., Shakhova E. G. Long-term food restriction prevents agingassociated sphingolipid turnover dysregulation in the brain // Arch. Gerontol.

Geriatr. – 2014. – 58, № 3. – P. 420—426.

9. Bartlett G. R. Phosphorus assay in column chromatography // J. Biol. Chem. – 1959. – 234. – P. 466—468.

10. Bligh E. G., Dyer W. J. A rapid method of total lipid extraction and purification // Can. J. Biochem. Physiol. – 1959. – 37, № 8. – P. 911—917.

11. Chicco A. J., Sparagna G. C. Role of cardiolipin alterations in mitochondrial dysfunction and disease // Am. J. Physiol. Cell Physiol. – 2007. – 292. – P. C33—C44.

12. Claypool S. M. Cardiolipin, a critical determinant of mitochondrial carrier protein assembly and function // Biochim. Biophys. Acta. – 2009. – 1788. – P. 2059— 2068.

13. Hatch G. M. Regulation of cardiolipin synthesis in the hearth // Mol. Cell.

Biochem. – 1996. – 159. – P. 139—148.

14. Hoch F. L. Cardiolipins and biomembrane function // Biochim. Biophys. Acta. – 1992. – 1113. – P. 71—133.

15. Kaewsuya P., Danielson N. D., Ekhterae D. Fluorescent determination of cardiolipin using 10-N-nonyl acridine orange // Anal. Bioanal. Chem. – 2007. – 387. – Р. 2775—2782.

16. Lowry O. N., Rosebrough N. J., Farr A. L., Randall R. J. Protein measurement with the Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. – 1951. – 193, № 1. – P. 365—375.

17. McMillin J. B., Dowhan W. Cardiolipin and apoptosis // Biochem. Biophys. Act. – 2002. – 1585. – P. 97—107.

18. Monteiro-Cardoso V. F., Oliveira M. M., Melo T. et al. Cardiolipin profile changes are associated to the early synaptic mitochondrial dysfunction in Alzheimer’s disease // J. Alzheimers Dis. – 2015. – 43, № 4. – Р. 1375—1392.

19. Novgorodov S. A., Wu B. X., Gudz T. I. et al. Novel pathway of ceramide production in mitochondria. Thioesterase and neutral ceramidase produce ceramide from sphingosine and acyl-coA. // J. Biol. Chem. – 2011. – 286, № 28. – Р. 25352—25362.

20. Ott M., Robertson J. D., Gogvadze V. et al. Cytochrome c release from mitochondria proceed by a two-step process // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. – 2002. – 99. – P. 1259—1263.

21. Paradies G., Petrosillo G., Pistolese M. et al. Decrease in mitochondrial complex 1 activity in ischemic/reperfused rat heart. Involvement of reactive oxygen species and cardiolipin // Circ. Res. – 2004. – 94. – P. 53—59.

22. Petrosillo G., Ruggiero F. M., Paradies G. Role of reactive oxygen species and cardiolipin in the release of cytochrome c from mitochondria. // FASEB J. – 2003. – 17, № 15. – Р. 2202—2208.

23. Sacket S. J., Chung H. Y., Okajima F., Im D. S. Increase in sphingolipid catabolic enzyme activity during aging // Acta Pharmacol. Sin. – 2009. – 30, № 10. – P. 1454—1461.

24. Stiban J., Caputo L., Colombini M. Ceramide synthesis in the endoplasmic reticulum can permeabilize mitochondria to proapoptotic proteins // J. Lipid Res. – 2008. – 49. – P. 625—634.

25. Tirodkar T. S., Voelkel-Johnson C. Sphingolipids in apoptosis (invited review) // Exp. Oncol. – 2012. – 34, № 3. – Р. 231—242.

26. Tsyupko A. N., Dudnik L. B., Evstigneeva R. P., Alessenko A. V. Effects of reduced and oxidized glutathione on sphingomyelinase activity and contents of sphingomyelin and lipid peroxidation products in murine liver // Biochemistry (Moscow). – 2001. – 66, № 9. – P. 1028—1034.

ISSN 0869 1703. ПРОБЛ. СТАРЕНИЯ И ДОЛГОЛЕТИЯ. 2015. Т.24. № 3–4 Н. А. БАБЕНКО, Г. В. СТОРОЖЕНКО

27. Webster J., Xu F. Y., Taylor W. et al. On the mechanism of the increase in cardiolipin in hepatocytes during rat liver regeneration // Biochem. J. – 2005. – 386. – P. 137—143.

28. Xu F. Y., Kelly S. L., Hatch G. M. N-Acetylsphingosine stimulates phosphatidylglycerolphosphate synthase activity in H9c2 cardiac cells // Biochem.

J. – 1999. – 337. – Р. 483—490.

29. Yoshimura Sh., Banno Y., Nakashima Sh. et al. Inhibition of neutral sphingomyelinase activation and ceramide formation by glutathione in hypoxic PC12 cell death // J. Neurochem. – 1999. – 73, № 2. – Р. 675—683.

–  –  –

КОРЕКЦІЯ ВІКОВОГО ПОРУШЕННЯ ВМІСТУ

КАРДІОЛІПІНУ В ТКАНИНАХ ЩУРІВ ШЛЯХОМ

ПРИГНІЧЕННЯ АКТИВНОСТІ НЕЙТРАЛЬНОЇ

СФІНГОМІЄЛІНАЗИ

–  –  –

Порушення метаболізму сфінголіпідів, що призводить до накопичення церамідів при старінні та при патологічних станах, як правило, супроводжується порушенням функціонування мітохондрій та зниженням рівня кардіоліпіну, що дозволяє припустити можливість модулювання вмісту кардіоліпіну шляхом корекції метаболізму сфінголіпідів. Беручи до уваги, що N-ацетилцистеїн ефективно знижує рівень цераміду, пригнічуючи активність нейтральної сфінгомієлінази, метою даній роботи явилось вивчення можливості корекції вмісту цераміду та кардіоліпіну в тканинах старих щурів.

Встановлено, що введення N-ацетилцистеїну 24-місячним щурам знижувало вміст цераміду та відношення церамід/сфінгомієлін, а також відновлювало вміст кардіоліпіну у серці та печінці старих щурів до рівня молодих тварин. Отримані данні дозволяють припустити, що вікове порушення метаболізму кардіоліпіну багато в чому опосередковується накопиченням цераміду в клітинах.

–  –  –

Dysregulation of sphingolipid turnover resulting in ceramide accumulation in old age and in pathology is followed by disturbances of mitochondria function and decrease of cardiolipin, thus making a modulation of cardiolipin content through correction of sphingolipid turnover possible. Taking into account that N-acetylcysteine (NAC) is capable of effectively decreasing the level of ceramide and inhibit neutral sphingomyelinase (SMase) activity the purpose of the present study was to explore opportunities for correction of ceramide and cardiolipin contents in the tissues of old rats. Administration of NAC to 24-month-old rats was found to decrease the level of ceramide and ceramide/sphingomyelin ratio, as well as to restore the content of cardiolipin in the liver and heart of old rats to that of the young animals. The data obtained may suggest that age-related disturbance of cardiolipin metabolism is mediated to a large measure by the accumulation of ceramide in the cells.

Сведения об авторах Отдел физиологии онтогенеза Н. А. Бабенко – зав. отделом, д.б.н., профессор Г. В. Стороженко – м.н.с. (galyna.storozhenko@gmail.com) ISSN 0869 1703. ПРОБЛ. СТАРЕНИЯ И ДОЛГОЛЕТИЯ. 2015. Т.24. № 3–4




Похожие работы:

«ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕХНОГЕННОГО СЫРЬЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ СТРОИТЕЛЬНЫХ И ТЕХНИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ Суворова О.В., Макаров Д.В., Кременецкая И.П., Васильева Т.Н. Институт химии и технологии редких элементов и минерального сырья им. И.В. Тананаева Кольского научного центра РАН Огромные объемы нак...»

«ДОГОВОР К ЭНЕРГЕТИЧЕСКОЙ ХАРТИИ Лиссабон, 17 декабря 1994 года Настоящий Договор ратифицирован постановлением Олий Мажлиса Республики Узбекистан от 22 декабря 1995 года № 192-I "О ратификации Договора к Энергетической Хартии и Протокола к Энергетической Хартии по вопросам энергетичес...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФГБОУ ВО "СГУ имени Н.Г. Чернышевского" Биологический факультет Рабочая программа дисциплины Биология индивидуального развития Направление подготовки 44.03.01 Педагогическое образование Профиль подготовки Биология Квалификаци...»

«ПОТАПОВ Дмитрий Викторович, САМОЙЛЕНКО Светлана Игоревна ВИДОВАЯ СТРУКТУРА СООБЩЕСТВ МЫШЕВИДНЫХ ГРЫЗУНОВ (НА ПРИМЕРЕ ГОМЕЛЬСКОГО РАЙОНА) В статье проанализированы видовой состав, особенности биотопического распределения и параметры биологического разнообразия сообществ мыш...»

«Министерство экологии и природных ресурсов Нижегородской области Нижегородское отделение Союза охраны птиц России Экологический центр "Дронт" Нижегородский государственный педагогический универс...»

«СОДЕРЖАНИЕ 1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ 2. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЙ ПРОГРАММЫ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ 3. ХАРАКТЕРИСТИКА ПРОФЕССИОНАЛЬНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ ВЫПУСКНИКА. 4 4. ПЛАНИРУЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ОСВОЕНИЯ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЙ ПРОГРАММЫ. 6 5. УЧЕБНЫЙ ПЛАН И ГРАФИК УЧЕБНОГО ПРОЦЕССА. 6. РАБОЧИЕ ПРОГРАММЫ ДИСЦИП...»

«СОГЛАШЕНИЕ МЭРОВ ПО КЛИМАТУ И ЭНЕРГИИ Мы, Мэры, подписывающие это Соглашение, разделяем видение устойчивого будущего – независимо от размеров нашего муниципалитета и его расположения на карте мира. Это общее видение с...»

«270 ЕКОНОМІКА ПРИРОДОКОРИСТУВАННЯ ТА ОХОРОНИ НАВКОЛИШНЬОГО СЕРЕДОВИЩА Светлана В. Шарыбар ФОРМИРОВАНИЕ РАЦИОНАЛЬНОЙ СОЦИАЛЬНО-ЭКОЛОГОЭКОНОМИЧЕСКОЙ ИНВЕСТИЦИОННОЙ ПОЛИТИКИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ ОРГАНИЗАЦИИ В статье показано, что формирование рациональной социально-экологоэкономичес...»










 
2017 www.book.lib-i.ru - «Бесплатная электронная библиотека - электронные ресурсы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.